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    當(dāng)前位置:首頁(yè)新聞中心DNA限制酶分析與切割

    DNA限制酶分析與切割

    更新時(shí)間:2013-02-21點(diǎn)擊次數(shù):1183

    儀器用具:
    37℃及65℃水浴或恒溫槽

    藥品試劑:
    質(zhì)體pBluescript II SK (-)
    限制酶:BamHI, PvuII 及ScaI (濃度均為10 units/μL, Invitrogen)
    10×Reaction buffer 6 (0.5 M Tris-HCl, pH 7.4; 60 mM MgCl2; 0.5 M NaCl; 0.5 M KCl)
    無(wú)菌水

    方法步驟:
    1) 取7 支微量離心管,依下表所列體積 (單位 μL) 依序加于管壁不同位置上。

    ◆ 每次吸取限制酶時(shí),請(qǐng)換一支新的微量移液器頭以免造成污染。
    總體積為20 μL,短暫離心后,以微量移液器頭輕輕混合,#1 置冰浴中,其余各管置于37℃反應(yīng)1 h。
    2) 置65℃水浴15 min 中止反應(yīng)后,移置冰浴冷卻,即可進(jìn)行電泳分析。